Các phương pháp tách chiết DNA/RNA
Có những phương pháp tách chiết DNA/RNA nào? Ưu và nhược điểm của mỗi phương pháp là gì?
Có nhiều cách phân loại phương pháp tách chiêt DNA/RNA. Cách phân loại thông dụng nhất là dựa trên cách thức thu nhận nucleic acid. Theo cách thu nhận nucleic acid, có thể phân loại phương pháp ly trích thành 3 nhóm:
– Tách thô: phá vỡ tế bào, giải phóng nucleic acid, không có bước phân lập hoàn toàn nucleic acid ra khỏi tạp chất.
– Phương pháp tủa: sử dụng phương pháp tủa DNA/RNA bằng hóa chất và lực ly tâm để phân tách phần lớn nucleic acid ra khỏi tạp chất.
+ Phương pháp phenol/chloroform
+Phương pháp tủa bằng muối (salting-out)
+ Phương pháp CTAB/chloroform
– Phương pháp dựa trên lực liên kết giữa DNA với phân tử silica: sử dụng lực liên kết giữa nucleic acid và hạt silica để phân lập nucleic acid ra khỏi tạp chất.
+ Phương pháp sử dụng cột silica (tách cột)
+ Phương pháp sử dụng hạt silica tự do (phương pháp Boom)
+ Phương pháp sử dụng hạt từ bao phủ silica (tách máy)
* Ưu nhược điểm của các phương pháp tách chiết DNAA/RNA:
| Phương pháp | Cột sillica | Hạt từ | Tách tủa | Tách thô |
| Ưu điểm | ♦ Hiệu suất thu hồi cao ♦Độ tinh sạch cao hơn so với tách thô♦Thời gian thực hiện nhanh (35phút/10 mẫu) ♦ Chi phí thấp hơn so với tách từ (25-40k/test) |
♦ Hiệu suất thu hồi cao
♦ Độ tinh sạch cao ♦ DNA/RNA thu nhận có thể bảo quản trong thời gian dài ♦ Thời gian thực hiện nhanh ♦ (32-96 mẫu/25 phút) ♦ Được tự động hóa, dễ thực hiện ♦ Ít khả năng lây nhiễm chéo |
♦ Lượng DNA/RNA thu được cao
♦ Chi phí thấp (5-6k/test) ♦ Quy trình thực hiện đơn giản |
♦ Thời gian thu nhận DNA/RNA cực nhanh
♦ Quy trình cực kỳ đơn giản, dễ thực hiện ♦ Chi phí hóa chất cực kỳ rẻ |
| Nhược điểm | ♦ Phải sử dụng các thiết bị hỗ trợ (ly tâm, bể ủ nhiệt, vortex)
♦ Lương DNA thu được bị giới hạn bởi diện tích màng ♦ Khả năng tách được mẫu có độ nhớt cao kém |
♦ Yêu cầu phải có máy tách chiết
♦Chi phí hóa chất cao, yêu cầu đúng loại kit cho máy |
♦ Đô tinh sạch thấp
♦ Thời gian tách chiết khá lâu ♦ Sử dụng hóa chất độc hại |
♦ Độ tinh sạch thấp
♦ DNA/RNA thu nhận không lưu được lâu |
Trên đây là toàn bộ thông tin về ưu, nhược điểm của các bộ Kit tách chiết đang được thương mại phổ biến trên thị trường. Hy vọng thông qua bài viết này các bạn sẽ có thêm kiến thức về các phương tách chiết DNA/RNA. Để biết thêm kinh nghiệm chọn kit tách chiết tối ưu nhất cho thí nghiệm của bạn, mời bạn tham khảo thêm bài viết Cách lựa chọn Kit tách chiết DNA/RNA phù hợp.
Công ty TNHH Thiết bị ABT chúng tôi luôn tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến xét nghiệm bệnh virus, vi khuẩn trên người, thực phẩm, thủy sản, thú y…Nếu có bất kì thắc mắc hay cần trợ giúp, Quý khách hàng vui lòng liên hệ thông tin dưới đây để được hỗ trợ nhanh chóng:
